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| 內容簡介： |
本书以生物高分子化合物——蛋白质、酶及核酸的分离和鉴定、代谢及其调控以及分子生物学基本技术为重点，介绍了生物高分子化合物的提取和纯化、结构和性质的分析方法、酶反应动力学分析、分子克隆技术、电泳法、层析法等基本研究技术，并对实验相关的理论进行了比较系统的阐述。
本书内容适应高等医学院校学生的教学需要，可作为本科生和研究生生物化学与分子生物学实验课程教材，也可供医学生物化学及分子生物学教学和科研工作者参考。
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| 目錄：
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第一章 生化实验基本技术
第一节 分光光度法
一、紫外及可见分光光度法
二、荧光光谱分析法
第二节 层析法
一、纸层析法
二、薄层层析法
三、离子交换层析法
四、凝胶层析法
第三节 电泳法
一、电泳方法的分类
二、电泳技术的应用
第四节 离心分离法
一、原理与计算
二、制备离心技术
三、分析超离心
本章参考文献
第二章 蛋白质的分子组成、结构及理化性质分析
第一节 概述
一、蛋白质分子的基本概念
二、蛋白质的分离和纯化
三、蛋白质的定量
四、蛋白质纯度的鉴定
五、蛋白质分子的序列分析
第二节 实验项目
实验一蛋白质的定量测定
Ⅰ.Kjeldahl定氮法
Ⅱ．Lowry酚试剂法
Ⅲ．紫外光谱吸收法
Ⅳ．考马斯亮蓝染色法
实验二生物体液和组织蛋白质的分离和鉴定
Ⅰ.血清IgG的分离纯化离子交换层析法
Ⅱ．细胞色素c的制备及鉴定
实验三血清蛋白质的电泳分离
Ⅰ.醋酸纤维薄膜电泳
Ⅱ．聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳
实验四蛋白质理化性质分析
Ⅰ.等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
Ⅱ．SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量
实验五蛋白质的分子筛层析分离及相对分子质量测定
Ⅰ.血红蛋白、DNP-鱼精蛋白混合物的分离分子筛层析法
Ⅱ．分子筛层析测定蛋白质相对分子质量
实验六蛋白质分子组成及末端氨基酸分析
Ⅰ.DNS法分析蛋白质氨基酸组分
Ⅱ．蛋白质及多肽的N-末端氨基酸分析FDNB法
Ⅲ．蛋白质及多肽的C-末端氨基酸分析羧肽酶法
实验七肽的N-末端测定及其顺序分析DABITC／PITC双偶合法
实验八固定化蛋白质的免疫生化鉴定Western印迹
本章参考文献
第三章 核酸的分子组成及理化性质分析
第一节 概述
一、核酸的分子组成与结构
二、核酸的理化性质
三、核酸的制备和含量测定
第二节 实验项目
实验九动物肝脏RNA的制备苯酚法
实验十小牛胸腺DNA的制备浓盐法
实验十一核酸的含量测定
Ⅰ.紫外吸收法测定核酸含量
Ⅱ．定磷法测定核酸含量
Ⅲ．地衣酚法测定RNA含量
Ⅳ．二苯胺显色法测定DNA含量
实验十二电泳法分离RNA和DNA
Ⅰ.琼脂糖凝胶电泳分离DNA
Ⅱ．聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE分离RNA
实验十三DNA碱基成分分析及含量测定
本章参考文献
第四章 酶作用及酶反应动力学分析
第一节 概述
一、酶反应动力学分析
二、酶的抑制作用动力学
三、影响酶反应速率的其他因素
四、酶试验
第二节 实验项目
实验十四蔗糖酶与淀粉酶作用的专一性
实验十五胰蛋白酶的亲和层析法纯化
实验十六酸性磷酸酶KM及Vmax值测定
附一、O．1N碘溶液的配制及标定
二、0．1N硫代硫酸钠溶液的配制及标定
实验十七磷酸盐及氟化钠对酸性磷酸酶的抑制作用
实验十八乳酸脱氢酶同工酶分析
本章参考文献
第五章 物质代谢及其激素调节
第一节 概述
一、物质代谢定义
二、研究目的、材料
三、研究方法
四、实验安排
第二节 实验项目
实验十九胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响
附Nelson-Somogyi法测定血糖浓度
实验二十饱食、饥饿及激素对肝糖元含量的影响
实验二十一三羧酸循环中间产物对酵母耗氧率的影响Warburg氏呼吸仪示教
附Warburg氏呼吸仪的构造和使用
实验二十二脂类的薄层层析
实验二十三酮体的生成与利用
实验二十四血清低密度脂蛋白与极低密度脂蛋白的比浊测定
附标准曲线的制作
实验二十五血清脂蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
实验二十六转氨基作用
实验二十七血清谷丙转氨酶活性的测定赖氏法
实验二十八生物氧化与电子传递
本章参考文献
第六章 分子生物学基本实验技术
第一节 概述
一、核酸是遗传物质
二、基因与基因组
三、DNA复制、损伤与修复
四、基因表达和遗传密码
五、基因表达的调控
六、分子生物学实验技术相关知识
第二节 实验项目
实验二十九质粒DNA的提取
实验三十质粒DNA酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定
实验三十一质粒DNA的分子杂交
实验三十二mRNA的提取与纯化
实验三十三血液标本中DNA的提取
实验三十四脉冲电场凝胶电泳
实验三十五RNA分析——Northern杂交
实验三十六聚合酶链反应PCR技术体外扩增DNA
实验三十七反转录聚合酶链反应RTI_PCR
实验三十八cDNA文库的构建
实验三十九PCR-RFLP法测定CYP2C19ml等位基因
实验四十等位基因特异扩增法分析基因中单碱基突变
实验四十一利用PCR差异显示mRNA
本章参考文献
附录
一、硫酸铵饱和度计算表
二、缓冲溶液的配制
三、常见蛋白质相对分子质量参考值
四、常见蛋白质等电点参考值
五、实验误差
六、实验报告
七、实验注意事项及应急处理
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