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內容簡介: |
《生物化学实验》(第三版)增加了一些新的现代生化的分析和测试法,如远红外测定法;动态光散射法;透射电镜法;原子力显微镜法等新内容。去掉不实用且陈旧的实验,增加一些目前常用和实用的实验,如增加比较简单实用的 残余法对粗脂肪含量的测定植物叶片在衰老过程中过氧化脂质含量的变化淀粉酶活力测定等实验。集基础性与经典性、理论与实际相结合,融知识传播、能力培养及素质教育为一体。
本教材适合于生物工程、制药工程、药学院制药和食品工程本科专业教学使用,也可供生物工程相关专业研究人员参考。
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關於作者: |
董晓燕,1962年生,博士,天津大学教授,著有《生物化学》获2011年教育部普通高等教育精品教材;《生物化学实验》(工科类专业适用)进入2014年教育部启动的国家精品资源共享课集成创新项目(iCourse)。
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目錄:
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第一章生物化学实验的基本要求001
第一节实验的准确性001
一、系统误差001
二、偶然误差002
三、过失错误002
第二节实验记录及报告002
一、实验记录003
二、实验报告003
第三节实验样品的制备004
一、动物脏器004
二、微生物004
三、细胞004
第二章常见的实验方法及基本原理006
第一节透析006
第二节沉淀007
一、蛋白质的特性007
二、常用的蛋白质沉淀方法008
第三节色谱010
一、色谱原理010
二、几种常见的色谱法011
第四节电泳017
一、电泳法的基本原理018
二、几种常用电泳法简介019
第五节分光光度法021
一、基本原理022
二、比色法022
三、分光光度法023
四、浊度法024
第六节离心024
第七节现代生化新方法026
一、荧光分光光度法026
二、旋光色散与圆二色性法031
三、核磁共振波谱法034
四、红外光谱法040
五、动态光散射法042
六、透射电镜法044
七、原子力显微镜法045
八、石英微晶天平047
第三章普通实验050
实验一实验的基本操作及要求050
一、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制方法050
二、搅拌和振荡051
三、容量玻璃器皿的使用方法052
四、思考题053
实验二糖的颜色反应054
一、莫氏实验054
二、塞氏实验055
三、杜氏(Tollen)试验055
四、思考题056
实验三3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定还原糖056
一、目的056
二、原理056
三、实验器材056
四、材料与试剂057
五、操作方法057
六、思考题058
实验四淀粉酶对壳聚糖降解过程的测定058
一、目的058
二、原理059
三、实验器材059
四、材料与试剂059
五、操作方法059
六、思考题060
实验五残余法对粗脂肪含量的测定061
一、目的061
二、原理061
三、实验器材061
四、材料与试剂061
五、操作方法061
六、结果与分析062
七、注意事项062
八、思考题062
实验六植物叶片在衰老过程中过氧化脂质含量的变化062
一、目的062
二、原理063
三、实验器材063
四、材料与试剂063
五、操作方法063
六、结果计算063
七、思考题064
实验七氨基酸的分离鉴定纸色谱法064
一、目的064
二、原理064
三、器材064
四、试剂064
五、操作方法065
六、思考题065
实验八离子交换色谱法分离氨基酸066
一、目的066
二、原理066
三、实验器材066
四、材料与试剂066
五、操作方法066
六、注意事项067
七、思考题068
实验九蛋白质性质(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应068
一、目的068
二、呈色反应068
三、思考题073
实验十蛋白质性质(二)蛋白质等电点的测定和沉淀反应073
一、蛋白质等电点的测定073
二、蛋白质的沉淀及变性075
三、尿蛋白定性检验076
四、思考题077
实验十一蛋白质的制备牛奶中提取酪蛋白077
一、目的077
二、原理078
三、器材078
四、材料与试剂078
五、操作方法078
六、思考题079
实验十二Bradford法测定蛋白质含量079
一、目的079
二、原理079
三、器材079
四、材料与试剂080
五、操作方法080
六、思考题080
实验十三紫外分光光度法测定蛋白质的含量080
一、目的080
二、原理081
三、实验器材081
四、材料与试剂081
五、操作方法081
六、思考题081
实验十四ANS荧光分析法测定蛋白质的外源荧光082
一、目的082
二、原理082
三、实验器材082
四、材料与试剂082
五、操作方法082
六、结果与分析083
七、注意事项083
八、思考题084
实验十五血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳084
一、目的084
二、原理084
三、器材084
四、材料与试剂085
五、操作方法085
六、思考题086
实验十六多酚氧化酶的制备、化学性质及影响酶活的各种因素086
一、目的086
二、原理087
三、实验器材087
四、材料和试剂087
五、操作方法088
六、思考题089
实验十七淀粉酶活力测定089
一、目的089
二、原理090
三、实验器材090
四、材料与试剂090
五、操作方法090
六、结果与分析091
七、注意事项091
八、思考题091
实验十八根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数Km091
一、目的091
二、原理091
三、实验器材093
四、材料与试剂093
五、操作方法093
六、思考题095
实验十九小牛胸腺DNA的制备及熔解温度的测定095
一、目的095
二、原理095
三、实验器材096
四、材料与试剂096
五、操作方法096
六、结果与分析097
七、注意事项097
八、思考题097
实验二十DNA的琼脂糖凝胶电泳097
一、目的097
二、原理097
三、器材098
四、材料及试剂098
五、操作方法098
六、思考题099
实验二十一质粒DNA的小量制备099
一、目的099
二、原理099
三、实验器材100
四、试剂及材料100
五、操作方法100
六、思考题101
实验二十二酵母RNA提取与定性和定量鉴定101
一、目的101
二、原理101
三、实验器材102
四、材料与试剂102
五、操作方法102
六、思考题103
实验二十三转氨基作用104
一、目的104
二、原理104
三、实验器材104
四、材料与试剂104
五、操作方法105
六、思考题106
第四章综合实验107
实验一SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹107
一、目的107
二、原理107
三、器材108
四、材料与试剂108
五、操作方法109
六、思考题112
实验二PCR扩增目的基因片段112
一、目的112
二、原理112
三、器材113
四、材料与试剂113
五、操作方法113
六、思考题114
实验三质粒DNA的酶切及连接114
一、目的114
二、原理114
三、实验器材114
四、材料与试剂115
五、操作方法115
六、思考题116
实验四重组DNA质粒的转化116
一、目的116
二、原理116
三、器材117
四、材料与试剂117
五、操作方法117
六、思考题118
实验五枯草芽孢杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定118
一、目的118
二、原理118
三、实验器材119
四、材料和试剂119
五、操作方法119
六、思考题121
实验六鸡卵黏蛋白的制备及活力的测定121
一、目的121
二、原理121
三、实验器材122
四、材料和试剂122
五、操作方法122
六、思考题125
附录126
一、实验室规则和安全防护126
二、常用仪器的使用128
三、缓冲溶液136
四、常用的硫酸铵饱和度计算表140
五、色谱法常用数据及性质141
六、分子生物学及基因工程常用试剂及数据145
七、一些常用单位153
参考文献155
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內容試閱:
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前言
随着学科发展,很多工科院校都设立了生物相关专业并开设了生物化学及生物化学实验课程。但工科类相关专业,对掌握生物化学及生物化学实验的知识要求范围与一般理科专业相差较大,因此急需根据不同学习对象进行教材改革。为适应这种需求,《生物化学实验》(工科类专业适用)第一版和第二版于2003年和2008年相继出版发行,并获得了使用学校和其他读者广泛的认可和欢迎。为适应学科及教学发展的需要,进一步提高本书的使用和参考价值,本次我们对本书的部分内容又进行了修改和补充,作为第三版重新出版。
第三版保留了上版的基本内容和特色,除对文字进行全面修订外,删除了一些陈旧的内容和实验,增加了一些新知识、新内容和新实验,具体体现在:
(1)为了适应生物技术发展的需要,将第二版第二章第七节常用的蛋白质现代分析法改为现代生化新方法,并添加了红外光谱法、动态光散射法、透射电镜法、原子力显微镜法、石英微晶天平的基本原理等,本节内容由张麟编写和修订。
(2)删除了第二版第三章中的实验五、七、九、十四、十八、二十、二十一、二十三和第四章的实验七。在第三版第三章中补充了实验五、十四、十七、十九(由冯远航负责编写)和二十三(由朱勇负责编写)。
(3)对原版第三章少数实验进行了重点修订(其中实验二、八、十五、二十二由冯远航修订,实验七和十三由张麟修订);在附录中增添了实验室规则和安全防护(由冯远航编写)。
我们希望通过上述修订使新版教材更具有前瞻性和实用性。
书中第一、二、四章由董晓燕负责修订,第三章由张麟、冯远航和朱勇负责修订,附录由冯远航和朱勇修订,参考资料由冯远航负责整理。最后全书的统编工作由董晓燕负责完成。
在新版教材发行之际,我首先感谢化学工业出版社对本书出版给予的大力支持;感谢天津大学化工学院生物工程系陈宁博士和徐锐硕士对书稿的通读和检查;也感谢天津大学化工学院大型仪器平台的邹少兰、何清、梁国弘、翟勇等老师和天津大学分析测试中心刘洋老师对本书第二章第七节现代生化新方法的审阅修改和建议;感谢天津大学化工学院各级领导多年来给予的支持;最后特别感谢全体作者的大力支持和积极配合。
董晓燕
2020年6月于天津大学
第一版前言
自20世纪70年代基因工程技术诞生以来,生物化学及分子生物学发生了深刻的变化。DNA重组技术使人们可以从分子水平上认识生命,从此生物技术得到了突飞猛进的发展,从事生命科学研究的人也越来越多,生物化学及分子生物学已渗透到很多学科领域。
近20年来,我国在生命科学与技术的研究也有很大的发展,特别是许多工科院校的相关专业都开设了生物化学及分子生物学课程。教育界认为,为了科学技术综合发展,需要更多的人了解生命科学,特别是作为生命科学基础的生物化学知识。在这种情况下,生物化学及生物化学实验的教学工作,面临着根据不同学习对象进行教学改革的需求。本书就是为适应这种需求而为工科院校相关专业学生编写的一本实验教材。
作者从1992年开始为天津大学生物化工专业硕士研究生及本科生开设生物化学及生物化学实验必修课以来,深感教学资料零散,没有工科专业合适的教科书,给学生掌握授课内容带来很大困难。因此,从1995年起,结合教学和科研工作,着手生物化学实验讲义的编写。同时将编写的内容用于近年本科生和研究生课教学实践,收到了良好的教学效果。最近,在与有关院校的交流中发现,他们也同感于实验教材的缺乏。因此,商议决定在原讲义内容的基础上,结合各专业的不同要求,增加了内容的系统性和完整性,形成本书的初稿。后经反复增删,完成了本书的修改工作。
本书重点收入了适合生物工程、制药工程、食品工程及其他相关轻工专业学习的生物化学实验内容。另外,为适应今后发展需要,还收入了部分分子生物学的基础实验内容。
全书共分4章,其中第一章和第二章由董晓燕编写;第三章由朱勇(实验一、二、三、四、五、十、十二、十三、十四、十五、十六、十八、十九、二十一、二十二)、张长平(实验八、九、十七、二十三、二十四)、曹东旭(实验六、七、十一、二十、二十五、二十六)编写;第四章由朱勇(实验四、五)、张长平(实验一、二、三、六)编写;书中的附录是由朱勇和曹东旭共同整理的。最后全书的统编工作由董晓燕和朱勇负责完成。
另外,天津科技大学的吕晓玲教授在百忙中对书稿提出了宝贵的意见;化学工业出版社对本书的出版给予了大力支持,在此谨向他们表示真诚的谢意。另外,借此机会,作者向各界朋友、老师、学长、同事以及天津大学各级领导多年来给予作者的支持、鼓励和教诲表示感谢。
生物化学是蓬勃发展中的学科,由于作者知识和经验有限,加之时间较短,书中错误和不足之处在所难免,敬请读者给予批评指正。
董晓燕
2002年盛夏于天津大学
第二版前言
伴随生物技术的迅猛发展,从事生命科学研究的人越来越多,生物化学及分子生物学已渗透到很多学科领域。特别是许多工科院校的相关专业都开设了生物化学及分子生物学课程。作者在教学工作中发现,工科类相关专业对生物化学及生物化学实验知识要求掌握的范围与一般理科专业相差较大,急需根据不同学习对象进行教材改革。为适应这种需求,第一版《生物化学实验》在2003年出版发行。4年来,重印多次,得到了使用学校广泛的认可和欢迎。但是,生物技术在不断发展且更新较快,为适应学科及教学发展的需要,进一步提高本书的使用和参考价值,我们对本书的部分内容进行了修改和补充,作为第二版重新出版。
第二版保留了第一版的基本内容和特色,除对文字进行全面修订外,删除了一些陈旧的实验,增加了一些新内容、新知识,具体体现在:
(1)在第二版第一章中增加了第七节常用的蛋白质现代分析法,主要介绍了荧光光谱、圆二色性和核磁共振技术的基本原理,目的是适应新研究的发展需要(此部分内容由河北理工大学生物技术系张俊杰编写)。
(2)删除了第一版第三章中的实验七、十一、二十、二十二、二十五和二十六。在第二版中补充了实验五、六、七、十八、十九和二十三(由北京理工大学生物技术系安宜和张钧负责编写);整合了第一版第三章中的实验十八和十九,成为新版第三章中的实验二十二,使教材更便于使用。
(3)对第三章少数实验(实验二、八、九、十四和十六)进行了修订,此部分内容由河北工业大学化工学院生物工程系王海鸥完成;同时对附录的内容进行了删减和补充(由天津大学化工学院生物工程系朱勇完成)。
(4)在新版第三章中增加了实验四和第四章中增加了实验七(朱勇编写),提高了教材的新颖性。
我们希望通过上述修订会使新版教材更具有前瞻性和实用性。
在新版教材发行之际,我首先感谢河北理工大学的贾长虹副教授在百忙之中通读了本书稿并提出了宝贵的意见;感谢天津大学化工学院生物化工系硕士研究生陈丽君和张拓宇对书稿文字处理和实验内容确认给予的帮助;另外,感谢化学工业出版社对本书的出版给予的大力支持,感谢天津大学十一五精品教材建设及各级领导多年来给予作者的支持、鼓励和教诲。最后特别感谢我的家人对我工作的长期支持。
董晓燕
2007年12月
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